影響色譜柱使用壽命的因素及解決方法

       在以水溶液為活動(dòng)相時(shí),水溶液中的微生物例如細(xì)菌輕易生長(zhǎng),當(dāng)用水溶液或有機(jī)酸緩沖液保護(hù)柱子時(shí),一些霉菌可能在色譜柱中滋生,堵塞固定相顆粒間的空隙。由于濕法填充技術(shù)的問(wèn)世,目前普遍使用的色譜柱填料直徑一般都小于10um,活動(dòng)相中的顆粒雜質(zhì)很輕易先沉積在柱頭然后慢慢堵塞柱子。活動(dòng)相的pH值對(duì)色譜柱也有影響,特別是對(duì)化學(xué)鍵合硅膠填料,水溶液的pH最適范圍在2~7.5之間,當(dāng)pH>8時(shí),硅膠會(huì)釋出天生絮狀物堵塞柱子,且難以復(fù)原,柱效很快降低,甚至完全失效。當(dāng)在緩沖液中加進(jìn)有機(jī)溶劑例如甲醇或乙腈時(shí),鹽類(lèi)的溶解度下降,會(huì)析出鹽沉淀,堵塞柱子。同時(shí)活動(dòng)相中的有機(jī)溶劑和鹽會(huì)腐蝕色譜柱頭的篩板,產(chǎn)生柱頭凹陷。活動(dòng)相的極性對(duì)柱子也有一定影響,對(duì)于硅膠柱,甲醇、水、冰乙酸等極性較大物質(zhì)會(huì)破壞填料,反之,對(duì)于化學(xué)鍵合硅膠,極性小的物質(zhì)如正丁醇、二氯甲烷等也起同樣的作用。堿性溶液會(huì)破壞陽(yáng)離子交換樹(shù)脂色譜柱,而酸性溶液輕易損壞陰離子交換樹(shù)脂柱。

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