此化合物經(jīng)對苯二酚、亞硫酸鈉還原成蘭色化合物--鉬藍(lán)。用分光光度計在波長660nm處測定鉬藍(lán)的吸光值，以測定磷的含量。反應(yīng)式為：
H3PO4+12（NH4）3MoO4+21HNO3→（NH4）3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O

2.      適用范圍
依據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)：GB12393-90， 此方法適用于所有食品及保健品中磷元素含量的測定。

3.      儀器
722可見分光光度計

4.      試劑
（1） 硝酸(G.R)， 高氯酸(G.R) 硫酸（A.R）
（2） 混合酸消化液：硝酸+高氯酸 按4+1混合
（3） 15%（V/V）硫酸溶液：取15ml硫酸緩慢加入到80ml水中，并定容至100ml。
（4） 5%（W/V）鉬酸銨溶液：取5g鉬酸銨，用15%硫酸溶液稀釋至100ml。
（5） 對苯二酚溶液：取0.5g對苯二酚于100ml水中，溶解后加一滴濃硫酸。
（6） 20%（W/V）亞硫酸鈉溶液（注：此溶液需在每次實驗前臨時配制）：稱取一定量的亞硫酸鈉，用蒸餾水溶解即可。
（7） 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控物：豬肝粉（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供），質(zhì)控物需室溫干燥保存。
（8） 國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供：磷標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，濃度為1000μg/mL
（9） 標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制：吸取1ml磷標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，然后移入100ml容量瓶中，用去離子水定容至100ml ，濃度為10mg/L

5.      操作步驟
5.1樣品消化：實驗操作需在無元素污染的環(huán)境中進(jìn)行。準(zhǔn)確稱取樣品干樣（0.3-0.7g左右）,濕樣(1.0g左右),飲料等其他液體樣品 (1.0-2.0g左右),然后將其放入50ml消化管中, 加混酸15ml（油樣或含糖量高的食品可多加些酸）,過夜。次日，將消化管放入消化爐中，消化開始時可將溫度調(diào)低（約130℃左右），然后逐步將溫度調(diào)高（最終調(diào)至240℃左右）進(jìn)行消化，一直消化到樣品冒白煙液體變成無色或黃綠色為止。若樣品未消化完全可再加幾毫升混酸，直到消化完全。消化完后，待涼，再加5ml去離子水，繼續(xù)加熱，直到消化管中的液體約剩2ml左右，取下，放涼，然后轉(zhuǎn)移至10ml試管中，再用去離子水沖洗消化管2-3次，并最終定容至10ml。
樣品進(jìn)行消化時，應(yīng)同時做樣品空白消化。
5.2磷標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.0ml、3.0ml、5.0ml至20ml刻度試管中，然后依次加入2ml鉬酸銨溶液、1ml亞硫酸鈉溶液、1ml對苯二酚溶液，加蒸餾水定容至20ml，混勻，靜置30分鐘，在波長660nm處測定其吸光度，由此計算出回歸系數(shù)，利用回歸方程計算或繪制成校正曲線。
5.3測定：取樣品及空白液各2ml分別至20ml試管中，然后依次加入2ml鉬酸銨溶液、1ml亞硫酸鈉溶液、1ml對苯二酚溶液，加蒸餾水定容至20ml，混勻，靜置30分鐘，在波長660nm處測定其吸光度，并根據(jù)測出的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上算得未知溶液中的磷含量。

6.      計算
X (mg/100g) = （C∕m ）×（V1∕V2 ）×100
式中：X----樣品中磷含量，mg/100g
C----由標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程算得樣品測定液中磷含量，mg
m---稱樣量 g
V1---消化液定溶總體積，ml
V2-測定用消化液的體積，ml
此元素最低檢出限為2μg

7.      注意事項
（1） 亞硫酸鈉溶液最好每次實驗前臨時配制，否則可能會使鉬藍(lán)溶液發(fā)生渾濁。
（2） 其次定容完后，靜置時間不亦過長，否則溶液顏色將會加深，其結(jié)果不準(zhǔn)確。