依托泊苷為細(xì)胞周期特異性抗腫瘤藥物，分子式為C29H32O13，作用于DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ，形成藥物-酶- DNA穩(wěn)定的可逆性復(fù)合物，阻礙DNA修復(fù)。實(shí)驗發(fā)現(xiàn)這復(fù)合物可隨藥物的清除而逆轉(zhuǎn) ，使損傷的DNA得到修復(fù)，降低了細(xì)胞毒作用。因此，延長藥物的給藥時間，可能 提高抗腫瘤活性。

儀器和試劑：     

       1.MA-1智能卡爾費(fèi)休水分測定儀

       3.10ul微量進(jìn)樣器

       4.容量法卡爾費(fèi)休試劑

5.無水甲醇

       步驟：
       1.吸甲醇：打開儀器電源開關(guān)，屏幕顯示主菜單，再點(diǎn)擊“吸甲醇”鍵，界面進(jìn)入吸甲醇項，長按該界面“吸甲醇”鍵，儀器開始向反應(yīng)杯中吸入甲醇狀態(tài)，此時應(yīng)將加料孔瓶塞放松(以甲醇液面浸沒電極兩電極柱位置結(jié)束)。
       2. 吸液：點(diǎn)擊“手動控制”鍵出現(xiàn)新的界面后再點(diǎn)擊“吸液”鍵，然后點(diǎn)擊“確定” 鍵，儀器開始將卡爾費(fèi)休試劑吸入計量管，直至到達(dá)下限時自動停止(吸液時三通轉(zhuǎn)換閥自動轉(zhuǎn)入吸液狀態(tài)，吸液停止后儀器自動反轉(zhuǎn)，三通閥再轉(zhuǎn)入注液狀態(tài))，界面退至手動控制狀態(tài)； 
       3.打空白：點(diǎn)擊“手動控制”鍵出現(xiàn)新的界面后再點(diǎn)擊“打空白”鍵，然后點(diǎn)擊“確 定”鍵，此時儀器進(jìn)入打空白(甲醇內(nèi)的水分)狀態(tài)，同時將第一次吸液中計量管中的空氣打空，空白打完后儀器自動結(jié)束并提示打空白結(jié)束。點(diǎn)擊“取消”鍵，界面退至手動控制狀 態(tài)，再按“取消”鍵，界面退至主菜單； 

       4. 標(biāo)定：點(diǎn)擊“標(biāo)定”鍵，然后用 10μl 微量注射器向反應(yīng)杯中注入 10μl (10mg)蒸餾 水，點(diǎn)擊“確定”鍵，儀器開始對卡爾費(fèi)休試劑進(jìn)行標(biāo)定。可連續(xù)標(biāo)定五次，儀器會將標(biāo)定結(jié)果 自動存入系統(tǒng)內(nèi)存并計算出平均值。待結(jié)束后，按“取消”鍵，界面退至主菜單；

5.稱量依托泊苷用萬分之一天平稱量，精確到 0.0001g

       6. 樣品檢測：點(diǎn)擊主菜單“自動 檢測”鍵，把已稱重的依托泊苷輸送到反應(yīng)杯中，并輸入樣品的重量，按確定鍵，儀器開始滴定，自動到終點(diǎn)，并自動計算樣品的含水量，3次測量取平均值。

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