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      9. 水質(zhì)對HPLC的影響

        發(fā)布于 2011/10/27閱讀(1136)來源 zxj標(biāo)簽 HPLC

        摘要

        水質(zhì)對HPLC的影響

        內(nèi)容

        水質(zhì)對HPLC的影響


        高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一種有效可靠的技術(shù),目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLC最常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結(jié)果的影響。
        1、顆粒
        顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它,這會導(dǎo)致回壓增大。顆粒還會表現(xiàn)為另一種固相,可能改變樣品的組分。
        2、有機(jī)物
        超純水中的有機(jī)物可能影響色譜峰的分離度和積分、可能導(dǎo)致鬼峰、還可能改變固定相的選測性以及影響色譜基線。
        3、離子
        離子濃度的改變會影響分離結(jié)果,部分能吸收UV的離子會對峰產(chǎn)生影響。某些有腐蝕性離子的還會降低高壓輸液泵等配件的使用壽命。
        4、膠體
        膠體會不可逆的吸附在固定相上面,影響柱的分離效果。
        5、微生物
        微生物會堵塞色譜柱,其代謝產(chǎn)物會增加有機(jī)物,顆粒等污染物。
         
        瓶裝純凈水和蒸餾水是目前部分HPLC分析中使用的純凈水,由于瓶裝純凈水和蒸餾水均只是普通純水而不是超純水,水中仍含有少量離子和有機(jī)物等雜質(zhì),用以配制液相和洗脫液不僅可能污堵昂貴的色譜柱,也影響HPLC定出平坦的基線。
        瓶裝純凈水的純化工藝,通常包括吸附、過濾、反滲透等,對顆粒性有機(jī)物的去除效果較好,但對微量離子及有機(jī)物的去除卻不能滿足高靈敏度的HPLC實驗之需求,并且,由于其包裝通常多為PVC瓶,透氧率高,同時存在一定的化學(xué)溶出量,從而污染瓶中的純凈水,尤其是保存一段時間后,水質(zhì)下降更多,因此表現(xiàn)在HPLC色譜圖上,雖無特定吸收峰,但基線存在較嚴(yán)重的不穩(wěn)干擾。
        蒸餾水是指用蒸餾方法制備的純水。可分一次和多次蒸餾水。水經(jīng)過一次蒸餾,不揮發(fā)的組分殘留在容器中被除去,揮發(fā)的組分進(jìn)入蒸餾水的初始餾分中,通常只收集餾分的中間部分,約占60%,要得到更純的水,可在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀溶液,除去有機(jī)物和二氧化碳;加入非揮發(fā)性的酸(硫酸或磷酸),使氨成為不揮發(fā)的銨鹽。通過對雙蒸水進(jìn)行HPLC檢測時發(fā)現(xiàn),254nm和214nm在22-27分鐘時都出現(xiàn)較強(qiáng)的吸收峰,這表明有疏水性較強(qiáng)的有機(jī)物污染,其原因應(yīng)是蒸餾過程的共沸現(xiàn)象導(dǎo)致了某些揮發(fā)性有機(jī)物去除不徹底。
         
        超純水系統(tǒng)綜合了反滲透、離子交換、活性炭吸附、膜過濾、超濾及紫外光氧化等多種純化工藝,產(chǎn)水電導(dǎo)率達(dá)到18.2MΩ?cm, 產(chǎn)水水質(zhì)超過國標(biāo)一級水標(biāo)準(zhǔn)且穩(wěn)定可測,超純水即取即用,不會因儲存引入污染,水質(zhì)有保證,較之使用瓶裝純凈水或蒸餾水,更能滿足用戶高精度儀器分析的需要。
         

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