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  • 磷的測(cè)定方法

    發(fā)布于 2011/11/07閱讀(1534)來(lái)源 zxj標(biāo)簽 分光光度計(jì)

    摘要

    原理 食物中的有機(jī)物經(jīng)酸氧化分解,使磷在酸性條件下與鉬酸銨結(jié)合生成磷鉬酸銨。

    內(nèi)容

     此化合物經(jīng)對(duì)苯二酚、亞硫酸鈉還原成蘭色化合物--鉬藍(lán)。用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)660nm處測(cè)定鉬藍(lán)的吸光值,以測(cè)定磷的含量。反應(yīng)式為:
    H3PO4+12(NH4)3MoO4+21HNO3→(NH4)3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O

    2.      適用范圍
    依據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn):GB12393-90, 此方法適用于所有食品及保健品中磷元素含量的測(cè)定。

     

    3.      儀器
    722可見(jiàn)分光光度計(jì)

     

    4.      試劑
    (1) 硝酸(G.R), 高氯酸(G.R) 硫酸(A.R)
    (2) 混合酸消化液:硝酸+高氯酸 按4+1混合
    (3) 15%(V/V)硫酸溶液:取15ml硫酸緩慢加入到80ml水中,并定容至100ml。
    (4) 5%(W/V)鉬酸銨溶液:取5g鉬酸銨,用15%硫酸溶液稀釋至100ml。
    (5) 對(duì)苯二酚溶液:取0.5g對(duì)苯二酚于100ml水中,溶解后加一滴濃硫酸。
    (6) 20%(W/V)亞硫酸鈉溶液(注:此溶液需在每次實(shí)驗(yàn)前臨時(shí)配制):稱取一定量的亞硫酸鈉,用蒸餾水溶解即可。
    (7) 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控物:豬肝粉(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供),質(zhì)控物需室溫干燥保存。
    (8) 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供:磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,濃度為1000μg/mL
    (9) 標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制:吸取1ml磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,然后移入100ml容量瓶中,用去離子水定容至100ml ,濃度為10mg/L

     

    5.      操作步驟
    5.1樣品消化:實(shí)驗(yàn)操作需在無(wú)元素污染的環(huán)境中進(jìn)行。準(zhǔn)確稱取樣品干樣(0.3-0.7g左右),濕樣(1.0g左右),飲料等其他液體樣品 (1.0-2.0g左右),然后將其放入50ml消化管中, 加混酸15ml(油樣或含糖量高的食品可多加些酸),過(guò)夜。次日,將消化管放入消化爐中,消化開(kāi)始時(shí)可將溫度調(diào)低(約130℃左右),然后逐步將溫度調(diào)高(最終調(diào)至240℃左右)進(jìn)行消化,一直消化到樣品冒白煙液體變成無(wú)色或黃綠色為止。若樣品未消化完全可再加幾毫升混酸,直到消化完全。消化完后,待涼,再加5ml去離子水,繼續(xù)加熱,直到消化管中的液體約剩2ml左右,取下,放涼,然后轉(zhuǎn)移至10ml試管中,再用去離子水沖洗消化管2-3次,并最終定容至10ml。
    樣品進(jìn)行消化時(shí),應(yīng)同時(shí)做樣品空白消化。
    5.2磷標(biāo)準(zhǔn)曲線:分別吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0ml、3.0ml、5.0ml至20ml刻度試管中,然后依次加入2ml鉬酸銨溶液、1ml亞硫酸鈉溶液、1ml對(duì)苯二酚溶液,加蒸餾水定容至20ml,混勻,靜置30分鐘,在波長(zhǎng)660nm處測(cè)定其吸光度,由此計(jì)算出回歸系數(shù),利用回歸方程計(jì)算或繪制成校正曲線。
    5.3測(cè)定:取樣品及空白液各2ml分別至20ml試管中,然后依次加入2ml鉬酸銨溶液、1ml亞硫酸鈉溶液、1ml對(duì)苯二酚溶液,加蒸餾水定容至20ml,混勻,靜置30分鐘,在波長(zhǎng)660nm處測(cè)定其吸光度,并根據(jù)測(cè)出的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上算得未知溶液中的磷含量。

     

    6.      計(jì)算
    X (mg/100g) = (C∕m )×(V1∕V2 )×100
    式中:X----樣品中磷含量,mg/100g
    C----由標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程算得樣品測(cè)定液中磷含量,mg
    m---稱樣量 g
    V1---消化液定溶總體積,ml
    V2-測(cè)定用消化液的體積,ml
    此元素最低檢出限為2μg

     

    7.      注意事項(xiàng)
    (1) 亞硫酸鈉溶液最好每次實(shí)驗(yàn)前臨時(shí)配制,否則可能會(huì)使鉬藍(lán)溶液發(fā)生渾濁。
    (2) 其次定容完后,靜置時(shí)間不亦過(guò)長(zhǎng),否則溶液顏色將會(huì)加深,其結(jié)果不準(zhǔn)確。

     


     

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