除非特殊說(shuō)明，在所有情況下，所用溶劑的體積應(yīng)該是色譜柱體積的 40-60 倍。

應(yīng)在清洗過(guò)程開始和結(jié)束時(shí)各測(cè)一次柱效和容量因子等，比較色譜柱性能的改善，以確定清

洗的效果。

確保色譜柱中沒有樣品和緩沖溶液，清洗前所用的溶劑應(yīng)與最初清洗時(shí)所用的溶劑相溶。

應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)測(cè)試時(shí)所用的流動(dòng)相與色譜柱中最后的溶劑相溶。

1 正相填料

用四氫呋喃沖洗。

用甲醇沖洗。

用四氫呋喃沖洗。

二氯甲烷沖洗。

用無(wú)苯正己烷沖洗。

2 反相填料

用 HPLC 級(jí)水沖洗，沖洗時(shí)進(jìn) 4 等份的 200μl 的二甲亞砜（DMSO）。

用甲醇沖洗。

用氯仿沖洗。

用甲醇沖洗。

3 陰離子交換填料

用 HPLC 級(jí)水沖洗。

用甲醇沖洗。

用氯仿沖洗。
 
4 陽(yáng)離子交換填料

用 HPLC 級(jí)水沖洗；在沖洗的過(guò)程中進(jìn) 4 等份 200μl 的 DMSO

四氫呋喃沖洗。

5 蛋白質(zhì)凝膠過(guò)濾填料

去除蛋白質(zhì)尺寸排阻介質(zhì)中的污染物有兩種清洗/再生的方法。

弱保留蛋白質(zhì)

用 30moL/L pH3.0 磷酸鹽緩沖液沖洗。

強(qiáng)保留蛋白質(zhì)

用 100%的水到 100%的乙腈梯度洗脫 60min。

6 多孔石墨化碳

多孔石墨碳有四種再生的方法，選用哪一種方法依賴于被分析物和所用的溶劑。

酸堿再生

適合于使用極性流動(dòng)相分析離子類分析物。

將色譜柱倒裝

用 50ml 含 0.1%三氟乙酸的四氫呋喃／水(1:1)溶液 1ml/min 流速?zèng)_冼。

用 50ml 含 0.1%三乙胺或氫氧化鈉的四氫呋喃／水(1:1)溶液 1ml/min 流速?zèng)_冼。

用 50ml 含 0.1%三氟乙酸的四氫呋喃／水(1:1)溶液 1ml/min 流速?zèng)_冼。

用 95%甲醇水溶液沖洗重新平衡。

將色譜柱改為正向。

作者：英國(guó)的 R.Plumb-Glaxo

強(qiáng)有機(jī)溶劑再生

適合于水相分析極性或離子類分析物。

用 50ml 丙酮以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 120ml 二丁醚以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 50ml 丙酮以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用水沖冼至平衡。

正相再生

適合于主要使用正相流動(dòng)相的多孔石墨化碳柱。

用 50ml 二氯甲烷以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 50ml 甲醇以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 50ml 水以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 50ml 0.1mol/L 鹽酸以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 50ml 水以流速 1ml/min 沖洗。

用 50ml 甲醇以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用 50ml 二氯甲烷以 1ml/min 流速?zèng)_洗。

用流動(dòng)相沖冼至平衡。