摘要
HP1100液相色譜儀使用操作規程總流程：超純水沖洗柱——流動相分離樣品——超純水沖洗柱 ——純乙睛保存柱
內容
HP1100液相色譜儀使用操作規程
1． 電源準備
打開穩壓器（ ）電源開關，須待電壓指示至 220V 后，才能開啟其他有關設備。
2． HP1100 高效液相色譜儀的準備
試劑：三氟乙酸
乙腈(Fisher 公司產品色譜純)
超純水(Millipore 超純水)
冰乙酸
溶液配置：貯液瓶與流動相的準備
A 液 0.1%三氟乙酸 （三氟乙酸 1ml，超純水 999ml）室溫保存
B 液 60%乙腈 （乙腈 600ml， 超純水 400ml）室溫保存
樣品液 0.01%乙酸 （冰乙酸 10 l 超純水 100ml）室溫保存
泵頭沖洗液：精濾后超純水或者是 1%色譜純甲醇 室溫保存
注：貯液瓶應用超純水淌洗干凈，備用。
流動相溶劑用潔凈 G4 玻沙漏斗精濾除去微小顆粒（目前未濾過溶液）。
操作者必須清楚并注明 A、B 貯液瓶盛裝為何種溶劑。
沖 洗 泵 頭 ： 用 注 射 管 于 軟 塑 料 管 末 端 抽 吸 至 有 水 流 出 ， 調 節 流 速 開 關 控 制 流 速 為20-30drop/min.（目前我們很少沖泵頭。）
① 流動相管道排氣
如果，管道中氣泡較多，可通過彈擊管道，排除氣泡，并逆時針旋轉脫氣泵活塞使其松動，用注射管于流動相出口的塑料管末端抽吸至管道內氣泡排除完全。操作時，我們通常已經打開了脫氣機（氣泡嚴重影響分離效果，所以觀察管道中液體是否有氣泡非常重要。）
② 開機
③ 進入 HP1100 操作系統
a.雙擊 WIN-95 操作界面中左下角 Instrument 1 online 圖標，進入 HP1100 工作站軟件操作界面。單擊工作站操作界面上方 Run control 菜單，在下拉菜單中找到 Sample Info 子菜單，單擊。在 Sample Info 信息框內定義操作者、樣品前綴及編號、保存路徑等參數。在保存路徑項下，將可定義子目錄分別輸入操作者拼音縮寫，以方便檢索時互不干擾。
b.等待工作站操作界面中泵、柱溫箱、檢測器各指示圖標由灰色轉變為綠色后，單擊泵、檢測器各圖標可從其各自彈出的菜單中設定流動相各溶劑比例、流速等。
（1） 流速通常為 1ml/min。檢測波長通常為 280，或者 254nm。
（2） A 液設置為 100%，運行 15-30 分鐘（目的是色譜柱的預平衡），觀察基線走勢，基線應為直線，通過單擊“Balance”鍵可將基線調至零點。待基線平穩后可進樣。
（3） 調整 A 液為 0，B 液為 100%再運行 60 分鐘（此時乙腈實際濃度為 60%）
（4） 在 A 液沖洗同時進行進樣環的沖洗：用 500ul 的針樣注射器，在 load 狀態，注入超純水 500ul。（反復三次，若是 20ul 進樣環，則加入 20ul 以上，多余的水可廢液管流出。通常同一樣品上樣 30 次后應沖洗進樣環，如果不同樣品，最好，每次上樣前均進行沖洗。）
（5） 吸取一定量可直接進樣的樣品溶液（上樣液最好用濾器濾過），將進樣閥逆時針旋至Load 檔，將進樣針從進樣孔處水平推入，按進樣器活塞將樣品溶液注射入進樣環后，立即將進樣閥順時針方向旋至 Inject 檔，與此同時，數據開始自動收集。
（6） 此時樣品分析已經完成。在 HP1100 主操作界面的檢測器圖標，關閉檢測器，然后關閉色譜儀主機檢測器開關（目的是延長檢測器壽命）。將 B 通道調為 0，A 通道調為 100%，即 A 液沖洗色譜柱約 10-30min。用 A 液續沖洗色譜柱約 10-30m（目的是沖出柱內殘留的雜質）
（7） A 通道換為 C 通道（100%乙腈）續沖洗色柱約 10-30min。（目的主要為保護柱）
④ 數據記錄的終止與保存
電腦將自動收集并保存數據，終止運行后，將自動彈出數據框，或者可通過 DATA ANALYSIS菜單，調出資料。
3． 圖譜處理
4． 關機
1） HP1100 的關閉
在 HP1100 的主操作界面上分別單擊關閉泵、檢測器圖標，或通過菜單關閉 。然后，單擊HP1100 的主操作界面右上方“X”，退出 Instrument 1 online 程序，返回至 WIN-95 操作界面。單擊左下角“Start”菜單，單擊“Shut down”,等待關機，待出現“Restart”提示后，按電腦主機電源鍵，關閉電腦主機及顯示器。將所有使用儀器用布蓋好。關閉排氣扇、空調與穩壓器開關。
2） 清潔衛生
實驗完畢后，打掃儀器室桌面與地面清潔，保持桌面整潔。
3） 儀器使用記錄
記錄當天的儀器使用情況于指定記錄本上，包括儀器使用起止時間與出現問題的解決方案，并簽上操作者的名字.
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