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發布于 2013/11/21閱讀(1456)來源 zxj標簽 色譜柱應用
摘要
內容
色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用
不同的色譜柱清洗方法各不相同比如:
3.1反相柱分別用甲醇:水=90:10,純甲醇(HPLC級),異丙醇(HPLC級),二氯甲烷(HPLC級)等溶劑作為流動相,依次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的次序沖洗。
3.2正相柱分別用正己烷(HPLC級),異丙醇(HPLC級),二氯甲烷(HPLC級),甲醇(HPLC級)等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高).注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷,所有的流動相必須嚴格脫水。
3.3離子交換柱長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
另外,還可以選擇能溶解柱內污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復到新柱的水平的.如果柱子裝反了,可以調回來,但可能會造成柱內擔體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。
加強色譜柱的維護與保養對于色譜柱高壓液相色譜中應用有著重要的意義,制定色譜柱管理的標準操作規程并嚴格執行。
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